正相柱就是固定相極性比流動(dòng)相極性大,對于正相柱,流動(dòng)相極性越大,洗脫能力越強(qiáng),出峰時(shí)間越快。正相柱一般用的流動(dòng)相比較多的是正己烷

等非極性溶劑,水是強(qiáng)極性溶劑,正相色譜中用的量很少，水含量稍微一點(diǎn)的小變化，就會(huì)對出峰時(shí)間有很大的影響，所以正相色譜對水分含量

極敏感。正相填料，硅膠、氨基、CN 基等，本身并無特殊，也不是碰到水就會(huì)損壞的。

正相色譜柱清洗步驟：

1.每次清洗都用低流速起步，當(dāng)檢測到柱壓穩(wěn)定在一定水平后再增加流速。
2.先用10柱體積不含其它添加劑的流動(dòng)相中的弱溶劑，如正己烷、氯仿等反沖色譜柱。
3.再用20柱體積的諸如二氯甲烷或異丙醇等流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑反沖色譜柱。
4.100%異丙醇的極性和正相洗脫能力足夠把正相柱上的所有殘留物清洗掉。如果異丙醇的清洗還不足以恢復(fù)色譜性能，則說明色譜柱柱床

有塌陷和空洞了，用清洗的方法無法解決這個(gè)問題。色譜癥狀和清洗再生過后的色譜性能恢復(fù)情況往往能提供色譜柱真正存在問題的線索。

問：HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法

答：

1、樣品量不足：解決辦法為增加樣品量 

2、樣品未從柱子中流出：可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動(dòng)相或柱子 

3、樣品與檢測器不匹配：根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測器 

4、檢測器衰減太多：調(diào)整衰減即可。 

5、檢測器時(shí)間常數(shù)太大：解決辦法為降低時(shí)間參數(shù) 

6、檢測器池窗污染：解決辦法為清洗池窗。 

7、檢測池中有氣泡：解決辦法為排氣。 

8、記錄儀測壓范圍不當(dāng)：調(diào)整電壓范圍即可。 

9、流動(dòng)相流量不合適：調(diào)整流速即可。 

10、檢測器與記錄儀超出校正曲線：解決辦法為檢查記錄儀與檢測器，重作校正曲線。